Masovna reja čipk navadne

Danes obstaja vrsta tehnologij za množično gojenje čipk navadnih. Vse tehnologije vzreje tega plenilca zagotavljajo veliko količino tega entomofaga z relativno nizkimi stroški. Množična reja navadne čipke vključuje naslednje tehnološke operacije: pridobivanje hrane za čipkaste čipke (jajca žitnih moljev ali drugih žuželk, pa tudi umetnih hranilnih medijev), inkubiranje pleniških jajc, posamično ali skupinsko vzgojo čipk, odstranjevanje odraslih žuželk, pridobivanje jajc, kopičenje in ohranjanje biomateriala. Glede na okoljske parametre vrste je treba na vsaki stopnji tehnologije razmnoževanja ustvariti določene pogoje temperature in vlažnosti, pa tudi entomofagu zagotoviti kakovostno hrano. Večina industrijskih biolaboratorij je vzrejala čipke in uporabljala jajca zrnatega molja kot hrano za ličinkeSitotroga cerealella

Reja navadne čipke na jajcih zrnatega molja

Številne študije domačih in tujih znanstvenikov so pokazale, da so jajca zrnatega molja popoln nadomestek naravne krme ličink pleničev. Za hranjenje ličink se običajno uporabljajo tako živahna (sveža) jajca sitrogenov kot tista, ki so izgubila sposobnost preživetja zaradi dolgega skladiščenja pri nizkih temperaturah. Ugotovljeno je bilo, da se njihova hranilna vrednost med dolgotrajnim skladiščenjem (do treh mesecev) ne zmanjša. To vam omogoča, da jih kopičite.

Masovna vzreja čipk navadnih jajc zrnih moljev se izvaja tako v laboratoriju kot na mehaniziran način s posebno industrijsko opremo.

Laboratorijska metoda množične vzreje čipk navadne

Tehnologija laboratorijske vzreje čipk vključuje naslednje operacije: pridobivanje maternične kulture čipk, inkubiranje jajc, posamična ali skupinska reja ličink, pridobivanje pleniških kokonov, zadrževanje odraslih žuželk in shranjevanje biomateriala.

Maternična kultura čipk

Laboratorijska vzreja se začne s pridobivanjem materničnega materiala, ki ga je mogoče dobiti v drugih bioloških laboratorijih ali biofakturah ali zbrati neposredno v naravi. Zbiranje čipk je najbolje opraviti konec poletja, tako da odrasle žuželke ujamejo na svetlobo, vključno z ultravijolično, ali s košnjo z metuljčkovo mrežo v poljskih pridelkih, kjer se uši nahajajo v masi, ali pa jo stresemo v mrežo metuljev iz gozdne vegetacije. Pred prezimovanjem odrasle najdemo v sadnih posevkih, na vrtovih in parkih, na drevesih in grmičih, kjer živijo, dokler novembra ne odidejo na prezimovanje. Čipke za odrasle, zbrane v drugi polovici oktobra, že začnejo vstopati v diapavzo in spremenijo barvo iz intenzivno zelene v bledo zeleno, nato pa se z znižanjem temperature spremenijo rumeno-zeleno z rjavo-rdečimi pikami na telesu.

Inkubacija jajc

Da bi pridobili kovanske ličinke plenilca, se sveže položena (v roku 24 ur) jajčeca odložijo v termostat, kjer preidejo v inkubacijsko obdobje pri temperaturi 25 ° C in relativni vlažnosti 80. Zaradi dejstva, da ličinke laceworm kažejo zelo izrazit kanibalizem, se dan pred njihovo rojstvom, torej dva dni po namestitvi na inkubacijo, jajčeca laceworm pakirajo v posebej izdelane celične kletke za individualno vzgojo ličink. Slednji je sestavljen iz svežnja iz debelega papirja v obliki satja, na dnu katerega je mlinski plin, raztegnjen nad lesenim okvirjem, in pokrovom - stekleno ploščo. Ko je sestavljena, vsaka celica v kombinaciji s dnom in pokrovom tvori izoliran posamezen vrt, ki meri 7 × 12–5,0 × 12,5 mm. Drugi vrtovi se lahko uporabljajo..

Pripravljena jajca pakiramo z raztresenjem, za to uporabimo preprosto napravo tipa paprike s hitrostjo dveh jajc na celico. Za zapolnitev enega vrta je potrebnih približno 800 jajc, kar ustreza masi 34,8 mg.

Nega ličinke

V celotnem obdobju posameznega razvoja ličink se hranijo trikrat. Hranjenje ličink laceworm poteka z razprševanjem jajčec sitrogenov z isto napravo kot med pakiranjem jajc laceworm. Prva postrežba jajc zrnate molje vnašamo sočasno z jajci entomofaga s hitrostjo 2 mg na celico. Nato je polaganje obloženo s steklom in vrt postavimo v termostat s temperaturo 25 ° C. Drugo hranjenje ličink opravljeno po dopolnjevanju druge starosti ali pet dni po prvi starosti. Do zdaj se je njihova glasnost močno povečala, zato se odmerek jajc poveča na 14 mg na celico. Za razliko od prvega med drugim hranjenjem se ličinke plenilcev predhodno anestezirajo z ogljikovim dioksidom, jajca sitotroga pa enakomerno raztresejo na steklu, predhodno naoljenega z medom in prekrijejo z vrtnim polaganjem. Za pospešitev te operacije je priporočljivo imeti dva kozarca za vsak vrt. To vam omogoča, da predhodno pripravite hrano za ličinke entomofaga in kozarec na vrtovih spremenite samo med hranjenjem. Pripravljene krožnike za hrano hranimo v hladilniku tri dni ali več..

Tretja postrežba jajc dajte, ko ličinke dosežejo tretjo starost, torej tri dni po drugi. Stopnja jajčec se v tem obdobju poveča na 16 mg na celico ali 6,4 g na vrt. Pri hranjenju ličink laceworm za odmerjanje krme je priročno uporabiti vnaprej pripravljene volumetrične ukrepe z zmogljivostjo, ki ustreza prvi, drugi, tretji krmi. Tri do pet dni po tretjem hranjenju se ličinke končajo s hranjenjem in lupljenjem. Če upoštevate režim izobraževanja z vsakega vrta, lahko dobite 450 čevapčičev.

Predlagana je skupinska metoda za usposabljanje ličink laceworm. Pri ličinkah prve in druge starosti se lahko z določeno gostoto plena ter optimalno temperaturo in vlažnostjo ter z zadostno hrano minimizira kanibalizem plenilcev. Na primer, če ličinke entomofaga shranite v navadnih pol litrskih kozarcih po 100 posameznikov, lahko dobite do 91,7 ličink druge osebe. Povečanje gostote čipk vodi do povečanja kanibalizma, njegova proizvodnja pa se močno zmanjša. Skupinski način zadrževanja ličink laceworm je upravičen le, če se pridobijo ličinke drugega namestnika. Za pridobitev imaga je ta metoda nesprejemljiva, saj ličinke tretjega bolnika pojedo mladiče.

Skrb za odrasle in pridobivanje jajc

Šest do sedem dni po nastanku kokonov jih premestijo v posebne kletke za vzgojo odraslih žuželk. Vrtovi so izdelani v obliki valjastih posod s premerom 30 cm in višino stene 10 cm. Za njihovo izdelavo se uporablja vinilna plastika, strešno železo ali drug material. Kot dno se uporablja mlinski plin z velikostjo mrežnega očesa 1,5 × 1,5 mm. Vrh vrta je prekrit s temno gosto krpo ali papirjem. Mlinski plin, papir ali krpa so pritrjeni na vrt s pomočjo obročka, ki ga napolni poseben vijak. Na notranjem delu sten vrta so nameščena držala spremenljivih plošč iz vinil plastike, na katere se nanesejo kapljice za hranjenje žuželk. Vsak vrt lahko vsebuje do 200 odraslih plenilcev. Velika gneča žuželk na vrtovih vodi do zmanjšanja plodnosti entomofagov. Ugotovljeno je bilo, da se s spremembo gostote čipk z 85 na 350 posameznikov na vrt plodnost plenilca zmanjša trikrat, z optimalno gostoto pa se začne množično odlaganje jajc žuželk 10-15 dni prej kot pri visoki gostoti.

Na plodnost čipk močno vpliva narava krme imago. Največjo sposobnost razmnoževanja pri žuželkah opazimo pri hranjenju s hrano z ogljikovimi hidrati. Plenilci imajo visoko plodnost pri krmljenju ženskih čipk z maltozo v kombinaciji s fruktozo, nižjo plodnost, ko v prehrano vnesejo glukozo in saharozo, in ko saharozo nadomesti sladkor, se plodnost žuželk zmanjša za 1,5-2,0 krat.

Med in sladkorni sirup se ponavadi uporabljata kot vir ogljikovih hidratov za hranjenje odraslih izpuščajev, avtolizat pivskih kvasovk pa se uporablja kot krmna beljakovina. K zgornji krmi je dobro dodati 2-odstotno raztopino čebeljega kruha. Če dodate celo majhno količino čebeljega kruha v prehrano z žuželkami, poveča njihovo življenjsko dobo. Pri hranjenju ene ogljikohidratne ali beljakovinske hrane se biološki parametri entomofaga zmanjšajo.

Tehnika hranjenja žuželk je, da se med ali stenski avtolizat kvas nanese na notranje stene zavihkov v obliki vrstic, ki se izmenično spreminjajo. V prvih štirih do petih dneh se žuželke hranijo le z medom ali sladkornim sirupom, nato pa se med in pivski kvas avtolizirajo, vsakega posebej. Razdalja med kapljicami medu mora biti približno 3 cm. Avtolizat se na zavihke nanese na vsaki dve vrsti medu. Število kapljic medu v vrsti vzdolž celotne višine jezička 10-12, kvasovk - 5-6.

Ko zamenjate krmo, da preprečite širjenje žuželk, jih anestezirajo. Če želite to narediti, uporabite posebno napravo s sesanjem zraka (na spodnji strani mize je nameščen navaden ventilator za gospodinjstvo z luknjo, izrezano glede na premer vrta). Ko je ventilator vklopljen, žuželke pritisnejo na mrežno dno kletke z zračnim tokom. Trenutno se odstrani zgornja tkanina ali papir z jajci, ki so na njih položeni, zavihki pa se spremenijo.

Jajca poberemo z rezanjem stebel z varnostno britvico. Vendar je treba upoštevati, da v tem primeru približno 20 od njih umre zaradi mehanskih poškodb. Primernejša metoda, ki temelji na raztapljanju stebel jajc v 0,8 raztopini natrijevega hipoklorit. Da bi to naredili, papirnati ali tkaninski vrh kletke z jajčeci na dno potopimo za 4 sekunde v vodno raztopino natrijevega hipoklorita, predhodno segreto na 24 ° C. Po tem papir ali tkanino 16 sekund zadržujemo na zraku in jajca operemo s curkom vode na gosto sito, posušimo in uporabimo po predvidenih.

Skladiščenje čipk

Za uspešno uporabo čipk je pomembno kopičenje zadostne zaloge plenilca, tako da je po potrebi mogoče sprostiti entomofago na velikih površinah. V ta namen je bila razvita tehnika za ohranjanje čipk v različnih fazah njenega razvoja..

Skladiščenje jajc. Optimalni pogoji za shranjevanje jajčnih jajc so temperatura 5 ° C in relativna vlažnost 80-90. Za konzerviranje so primerna samo sveže položena jajca. Stopnja preživetja jajčec med skladiščenjem se razlikuje glede na fazo embrionalnega razvoja. Najbolj sprejemljivo skladiščenje jajc, kadar obdobje skladiščenja ni več kot 20 dni. V tem obdobju 76–96 zarodkov ostane sposobnih preživeti. Daljše konzerviranje nima praktične vrednosti, saj večina jajčec v tem času izgubi sposobnost preživetja. Torej, medtem ko jajčeca vzdržujemo v 30-35 dneh, umre 36-50 zarodkov.

Skladišče ličink. Kot jajčece so tudi ličinke čipk neprimerne za dolgoročno ohranjanje. Pri nizkih temperaturah se hranijo 30-40 dni. Ličinke prve starosti so bolj primerne za to. Ličinke druge in tretje starosti se lahko hranijo do 20 dni. Z daljšim skladiščenjem se njihova sposobnost preživetja zmanjšuje.

Shranjevanje kokonov. Ohranjeni so le tisti kokoni, v katerih nastajajo kašice, torej sedem dni po nastanku kokona. Kokoni z lutkami niso nastali, tudi med 10-dnevnim skladiščenjem umrejo (30-36). Pupa se hrani pri temperaturi 2 ° C in relativni vlažnosti 75. Vendar največji vpliv na njihovo preživetje povzroči trajanje skladiščenja, ki ne sme presegati 10 dni. Daljše bivanje pri nizkih temperaturah vodi do pomembne smrti žuželk. Torej, če se hrani 20 dni, je sposobnost preživetja ohranjena le pri 41-52 mladičih.

Skladiščenje odraslih reproduktivnih posameznikov. Najboljši pogoji za ohranjanje odraslih aktivnih žuželk so temperatura 4 ° C in relativna vlažnost 70-90. Čipke za odrasle shranjujemo v okroglih sitah ali v steklenih pol litrskih ali litrskih kozarcih. Za povečanje skupne uporabne površine je v bankah postavljen križni trak iz pločevine, ki banko razdeli na štiri sektorje.

Za shranjevanje se uporabljajo mlade žuželke (samci in samice). V pol litrskem kozarcu je nameščenih do 200 žuželk, v bankah z večjo prostornino se njihovo število poveča v skladu s količino. Pred začetkom postopka skladiščenja žuželke hranijo medu pet do sedem dni. V času shranjevanja entomofagov se občasno (enkrat na pet dni) hranijo z medom ali sladkornim sirupom. Žuželke, namenjene shranjevanju, kvasa ne dajejo avtolize. Takšni pogoji omogočajo dolgoročno ohranitev entomofagov (stopnja preživetja 85-90) z zadovoljivo reproduktivno sposobnostjo. Upoštevajte, da dolgoročno shranjevanje aktivnih samic zmanjša njihovo življenjsko dobo.

Skladiščenje čipk za oči za odrasle. Običajna čipka v življenjskem ciklu ima domišljijsko diapavzo, ta funkcija se uporablja pri shranjevanju žuželk. Pogoji so zanje predhodno ustvarjeni (kratek dan, ki traja 10–12 ur, 22–34 dni), potreben za indukcijo diapavze v čipkanje. Za pospešitev procesa prehoda žuželk v stanje diapavze je beljakovinska krma v tem obdobju izključena iz njihove prehrane in se hrani samo s sladkornim sirupom. Med diapavzo čipke ne odlagajo jajc. Navzven od aktivnih se razlikujejo po barvi telesa..

Različne čipke se hranijo pri temperaturi 5 ° C in relativni vlažnosti 70. V času skladiščenja žuželke nenehno napajajo mešanico sladkornega sirupa ali medu iz avtolizata pivskega kvasa. To je potrebno za povečanje plodnosti plenilcev..

Žuželke z območja so primernejše za shranjevanje kot aktivni posamezniki. Celo 150 dni po skladiščenju preživi več kot 70 čipk, iz jajc, ki so jih odložili, se regenerira do 93 živahnih ličink. Insekti se ponovno aktivirajo pri svetlobnem obdobju 16 ur in temperaturi zraka nad 5 ° C.

Tehnologija mehanizirane vzreje čipk navadne

Na podlagi dolgoletnih laboratorijskih raziskav so zaposleni v Uzbekistanskem znanstvenoraziskovalnem inštitutu za varstvo rastlin (Taškent) razvili nabor opreme (linijo) za množično rejo čipk. Set opreme je sestavljen iz sobne opreme s termostatom z nadzorovano mikroklimo in treh kosov opreme, namenjenih različnim tehnološkim operacijam pri vzreji čipk.

Imenovanje, tehnični podatki in načelo delovanja opreme za množično gojenje čipk navadne

Mehanizirana linija je zasnovana za množično gojenje čipk navadnih. Vgrajen je v laboratorijske prostore, v katerih omrežja z električnim tokom 220/380 V, 50 Hz AC, vodovod, prezračevanje, kanalizacija.

Produktivnost te mehanizirane linije je 1,0 milijona jajčnih jajc na dan. Glavne komponente mehanizirane linije za vzrejo čipk navadne in glavni funkcionalni kazalci ter namen njenih posameznih delov so podani v tabela 1 in 2.

Tabela 1

Glavne sestavine linije množične vzreje čipk

Tabela 2

Glavni funkcijski kazalniki namen posameznih delov opreme za množično vzrejo čipk

Enota za odmerjanje hrane za ličinke laceworm Namenjen je doziranju krme v hekselskih celicah, gre za okvir z nameščenim perforiranim dotokom.

Da se lahko vse ličinke čipk razvijejo približno istočasno, se za inkubacijo odvzamejo samo sveže jajca. Jajca plenilca ene zbirke pomešamo z jajci sitotroga v razmerju 5 mg sitotroga na jajce čipke in pri izračunu 17-20 g jajc sitotroga na heksel.

Dozirna plošča zagotavlja, da se v vsako celico s šestkotno dovaja 10 mg krme. Po šestih do osmih dneh v dozirni enoti krme opravimo po 10 do 10 mg v vsaki celici. Po 12-15 dneh se ličinke, ko se je dokončal razvoj, lupijo v celicah heksela. Dva do tri dni po puljenju ličink ali 15-17 dni po odlaganju jajčec se heksel prenese v obrat za odstranjevanje in odvzem kokonov.

Naprava za odstranjevanje in nabiranje zapredkov čipk zasnovan za odstranjevanje in zbiranje kokonov čipk iz heksel fig 1. Enota je opremljena z električnim pogonom s transporterjem dovajanja šestilov. Tlak pnevmatskega sistema za pihanje kokonov v 3-4 atm. podprta s kompresorjem. Na dnu transporterja je kokosova ponev s plinsko mrežo. Zbrani kokoni so postavljeni v kletke za odhod odraslih in njihovo nadaljnje vzdrževanje.

Klimatska soba Zasnovan za vzrejo odraslih in ličink lavorjev v optimalnih higrotermalnih pogojih. Podpirati mora naslednje parametre: temperatura zraka 26 ± 1 ° C, relativna vlažnost 70 ± 5, fotoperioda 10-18 h.

Tehnološki postopek izdelave čipk. Tehnologija mehanizirane vzreje čipk je sestavljena iz naslednjih glavnih proizvodnih procesov:

1. Zbiranje naravnih populacij entomofagov.
2. Priprava krme.
3. Vsebnost odraslih žuželk v kletkah ali bankah.
4. Zbiranje jajčnih čipk.
5. Inkubacija valilnih jajc.
6. Posamezne rastoče ličinke v hexels.
7. Odstranjevanje in nabiranje kokonov čipk.
8. Polaganje kokonov v kozarce.
9. Razmnoževanje biomateriala.
10. Shranjevanje biomateriala za uporabo.

Odrasli čipkarji vsebujejo 150 kosov v steklenih trilitrskih kozarcih. ali v posebnih kletkah za 3,5 tisoč kosov. Banke ali kletke so postavljene na stojala v termostatski sobi z nastavljivo fotoperiodo ali v klimatsko omarico. Optimalna temperatura čipk je 24-26 ° C, relativna vlažnost 65-70. Entomofag imago se hrani z medom in avtolizatom pivskih kvasovk. Trakovi temnega bombaža so položeni v kozarce, na katere samice čipke odložijo jajčeca. Če se čipke hranijo v bankah vsak drugi dan, na njih položijo trakove z jajci, odstranijo čipke iz pločevinke in položijo čiste trakove, jajčne čipke previdno odrežemo s škarjami iz dela trakov, ostala jajca predstavljajo tržne izdelke. Odrezana jajčna jajca se pomešajo s jajci sitotroga v razmerju 5 mg jajčec sitotroga na eno jajčece črevesja in na osnovi 17-20 g jajc sitotroga, pomešanih z jajčecami jajc v navedenem razmerju, vlijemo na dozirno ploščo dozirne enote. Ko napolnite odmerek jajc s krmo v posebno napravo - hexel, jo zaprete s pokrovom. Šestice so postavljene na posebne stojala (fig 2) v termostatskem prostoru z nastavljivo fotoperiodo pri temperaturi 24-26 ° C, kjer vsebujejo 15-17 dni.

Sedem dni po polaganju se opravi drugo hranjenje ličink laceworm z odmerkom 17-20 g jajc sitotroga na heksel. Po 15-17 dneh se odprejo pokrovi heklov in na napravi se za odstranjevanje kokonov naberejo kokosi laceworm (fig 1) in 150 kosov. položeni v banke ali kletke. Ličinke, ki niso imele časa za lupljenje, so položene v epruvete 1 vzorca. in sitotroge hranite z jajci, dokler se ne pokorijo. Po začetku odhoda imaga se postopek reprodukcije ponovi. Enkrat na vsake štiri do pet dni se banke odraslih čipk zamenjajo s čistimi, saj se ličinke regenerirajo iz jajc, položenih na stene pločevinke, kažejo kanibalizem in jedo sveže položena jajca entomofaga.

Reja navadne čipke na umetnih hranilnih medijih

Najobetavnejši substrati za krmo navadnih ličink laceworm so mikrokapsulirani hranilni mediji, ki po fizikalnih lastnostih in biokemični sestavi posnemajo naravno hrano plenilca.

Izdelana je bila več tekočih umetnih hranilnih medijev za usposabljanje ličink laceworm in naprava za pakiranje hranilnih medijev v mikrokapsule. Uporaba mikrokapsuliranega gojišča za umetno kulturo omogoča znižanje stroškov jajc zrnih moljev za 90–92 in znatno zmanjšanje skupnih stroškov plemenske čipke.

Vrste umetnih hranilnih medijev in tehnologije za njihovo pripravo

Znano je, da se navadna čipka najučinkoviteje uporablja pri biološkem zatiranju listnih uši v fazi ličink drugega inštrumenta. Za hranjenje ličink se uporablja več vrst kulturnih medijev (zavihek. 3).

Tabela 3

Formulacija umetnih hranilnih medijev za ličinke navadne čipke

Hranilne snovi (I-III) se priporočajo za hranjenje ličink od trenutka ponovnega rojstva do prve molte in na začetku druge starosti. Ta okolja so popolnoma zamenljiva in se uporabljajo glede na prisotnost določenih komponent v biološkem laboratoriju. Sreda IV se priporoča za usposabljanje ličink laceworm iz drugega in tretjega stoletja med razmnoževanjem populacij laboratorijske čipke.

Pridobitev encimskega hidrolizata kazeina

Priprava raztopine 2. kazeina. Kazein (30 g) smo tri ure mešali z 1500 ml 0,01 n raztopine KOH pri 40 ° C. Vrednost pH se spremlja vsakih 15 min in vzdržuje znotraj pH 8 z dodatkom kapljic 0,1 n KOH. Nastala raztopina je bistra, močno opalescentna tekočina..

Hidrolizat trebušne slinavke. Pankreatinum (300 mg) zmešamo s 5 ml 2 raztopine kazeina v 0,01 n KOH pri 40 ° C 40 minut. Nastala raztopina za encimski pripravek se doda v večji del alkalne raztopine kazeina v treh enakih delih vsake 3 ure. Po dodajanju zadnjega dela encima raztopino mešamo nadaljnjih 15 ur pri 40 ° C in pH 8.

Pepsinovo zdravljenje hidrolizata trebušne slinavke. Na koncu hidrolize trebušne slinavke raztopino nakisamo z 2 n žveplova kislina z intenzivnim mešanjem do pH 2. Pepsin (300 mg) raztopimo z mešanjem v 5 ml vode in ga v 3 enake dele vnesemo v zakisani hidrolizat vsake 3 ure. Po dodajanju zadnjega dela encima smo reakcijsko mešanico mešali nadaljnjih 15 ur pri 40 ° C in pH 2.

Na koncu hidrolize ji po kapljicah dodamo nasičeno vodno raztopino barijevega hidroksida na pH 7. Nastalo oborino barijevega sulfata ločimo s centrifugiranjem (5700g, 5 ° C, 10 min) in odstranimo. Supernatant koncentriramo do prostornine 150 ml, koncentrirani hidrolizat liofiliziramo. Liofilizirani encimski hidrolizat kazeina je bel amorfni prah, ki je hitro topen v vodi. Dobitek 28,5 g (95).

Pridobivanje encimskega hidrolizata sojinih beljakovin

Izolacija beljakovin iz soje. Sojina semena (375 g) zdrobimo v električnem mlinu, pomešamo z 1 L petrolejtra, mešamo eno uro pri 20 ° C, oborino ločimo s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 5 min). Razmaščevanje sojine moke se ponovi še dvakrat, nakar se posuši na zraku. Dobitek posnete moke je 300 g (80). Nastalo sojino moko eno uro pri 20 ° C intenzivno mešamo s 3 l destilirane vode..

Del, ki se ni raztopil, smo ločili s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 30 min) in oborili, supernatant po mešanju kapljic z 0,1 N klorovodikovo kislino do pH 4,5 ob mešanju pustili 1 uro pri 20 ° C. Oborino ločimo s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 10 min), izperemo s hladno vodo (3 × 100 ml), supernatant in izpiranje zavržemo. Oborino zmešamo z 0,5 1 vode, zmesi po kapljicah dodamo 0,1 n KOH, zbistrimo s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 30 min). Supernatant nakisamo z 0,1 N klorovodikovo kislino do pH 4,5, mešanico mešamo eno uro pri 20 ° C. Recipitirani protein smo ločili s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 30 min), sprali s hladno vodo (3 × 100 ml) in liofilizirali. Dobitek liofiliziranih beljakovin je 30 g (10).

Priprava 2. raztopine sojinih beljakovin. Liofilizirani protein (30 g) smo mešali pri 40 ° C z 1500 ml raztopine 0,01 N KOH 3 ure. PH raztopine smo vzdrževali z dodajanjem kapljic 0,1 N KOH na osem. Nato raztopino segrejemo v vodni kopeli (90-95 ° C, 30 min) in ohladimo na sobno temperaturo.

Predelava nastale raztopine s pankreatinom. Pankreatin (1 g) raztopimo v 5 ml 2 sojine beljakovinske raztopine ob mešanju 40 minut. Nastalo raztopino dodamo na tri enake dele glavnemu volumnu raztopine sojinega proteina vsake 3 ure. Trajanje encimske hidrolize je 48 ur (40 ° C, intenzivno mešanje).

Pepsinovo zdravljenje hidrolizata trebušne slinavke. Na koncu hidrolize trebušne slinavke, 2N raztopine žveplove kisline, pH hidrolizata prilagodimo na dva. Nato 300 mg pepsina raztopimo v 5 ml vode in v treh enakih delih dodamo sojin protein hidrolizat vsake 3 ure. Hidroliza traja 24 ur pri pH 2, 40 ° C z močnim mešanjem.

PH raztopine smo prilagodili na pH 7 z dodatkom nasičene vodne raztopine hidrata barijevega oksida. Oborino odstranimo s centrifugiranjem (5700 g, 10 ° C, 10 min), supernatant liofiliziramo.

Liofilizirani encimski hidrolizat sojinih beljakovin je rumenkast amorfen prah, topen v vodi. Dobitek - 20 g (66).

Oba pripravka encimskih hidrolizatov za beljakovine sta shranjena v hermetično zaprti stekleni posodi pri 5 ° C do 12 mesecev.

Pridobitev mešanice lipidov

V minimalni količini žveplovega etra raztopimo 1 g holesterola, pomešano s 5 g sojinega olja v 5 g sončničnega lecitina. Žveplov eter uparimo pri temperaturi vodne kopeli, ki ni višja od 40 ° C. Zmes lahko hranimo pri 5 ° C eno leto..

Pridobivanje ekstrakta kvasa

1,8 kg biomase pivskega kvasa ločimo od hranilnega substrata s centrifugiranjem (5700 g, 4 ° C, 20 min).Saccharomyces cerevisiae) in dvakrat speremo s hladno destilirano vodo. Avtoliza poteka v 2,7 l vode pri 37 ° C (razmerje med biomaso kvasa in vode je 1: 1,5) dva dni. Dobljeni avtolizat centrifugiramo (5700 g, 4 ° C, 20 min), filtriramo skozi bakterijski filter in liofiliziramo. Dobitek liofiliziranega ekstrakta je 10 mas.% Surovega kvasa.

Liofilizirani suhi kvasni ekstrakt je rjav higroskopski amorfni prah, topen v vodi brez ostankov. Rok uporabnosti pri 5 ° C - vsaj 12 mesecev.

Pridobivanje ekstrakta pšeničnih kalčkov

330 g pšeničnih kalčkov zdrobimo v električnem mlinu, pomešamo z 0,9 L petroletra in mešamo 2 uri pri 20 ° C. Oborino ločimo s centrifugiranjem (5700 g, 4 ° C, 10 min). Razmaščevanje zarodkov se ponovi še dvakrat, nakar se posušijo na zraku. Donos moke brez maščobe 100 g (30,3).

100 g moke iz pšeničnih kalčkov brez maščobe (razmerje med moko in vodo - 1:10) zmešamo z destilirano vodo in mešamo še 4 ure pri temperaturi 20 ° C. Oborino ločimo s centrifugiranjem (5700 4 ° C, 20 min) in nato ponovno ekstrahiramo z vodo (razmerje moke proti vodi - 1: 5). Pralna voda se kombinira in liofilizira. Dobitek liofiliziranega ekstrakta pšeničnih kalčkov je 41 g (41).

Liofiliziran ekstrakt pšeničnih kalčkov je beli amorfni prah, hitro topen v vodi. Rok uporabnosti pri 5 ° C - vsaj 12 mesecev.

Priprava kulturnih medijev

Sreda 1. V 60 ml destilirane vode raztopimo 80 mg NaH2PO4 × 2H2O, 6 g saharoze ali živilskega sladkorja in 4,24 g ekstrakta kvasa. Zmes smo hranili pri sobni temperaturi 3 ure, nato pa v njej raztopili 4,32 g ekstrakta pšeničnih kalčkov, 4,8 g peptona, 0,25 ml 20% raztopine holin klorida (50 mg), 1 ml raztopine vitamina B12. 0,004 mg), 100 mg vitamina C, 24 mg barvila (nevtralno rdeče), 120 mg emulgatorja (tween-80) in 120 mg mešanice lipidov. Skupna prostornina hranilnega medija se prilagodi z destilirano vodo na 120 ml.

Po dodajanju vsake sestavine zmes temeljito stresemo. Končno mešanje izvedemo z električnim homogenizatorjem (8000 vrt./min., 2 minute). Homogenizirani rastni medij filtriramo skozi stekleni filter št. 3. Končni medij je pakiran v steklene ampule, zapečaten in shranjen pri temperaturi minus 10 ° C. Dovoljeni rok uporabnosti v teh pogojih ne presega 6 mesecev.

Srede II in III. Pripravljen je na enak način kot medij I, le da namesto peptona dodamo potrebno količino kazein encimskega hidrolizata.

Sreda IV. Vzorce mineralnih soli raztopimo v 25 ml raztopine vitamina B2 (1 mg): K2HP04 × ZN20 - 160 mg, MgS04 × 7H20 - 50 mg, NaH2P04 × 2H2O - 80 mg in 20 mg inozitola. Nato dodamo vnaprej pripravljene vodne raztopine vitaminov - 1 ml raztopine mešanice nikotinske kisline in kalcijevega pantotenata (vsak 2 mg), 1 ml raztopine mešanice vitaminov B1 in B6 (0,5 mg vsak), 1 ml raztopine biotina (0,04 mg ), 1 ml raztopine vitamina B12 (0,004 mg), 54 ml raztopine folne kisline (0,5 mg), 0,25 ml 20. raztopine holin klorida (50 mg) in 1 ml raztopine FeS04 × H20 (5 mg).

V dobljeni mešanici mineralov in vitaminov se raztopi 15 g saharoze ali prehranskega sladkorja, 5 g encimskega hidrolizata kazeina, 5 g encimskega hidrolizata sojinih beljakovin, 100 mg vitamina C in 24 mg nevtralnega rdečega barvila. Nato v zmes dodamo 120 mg Tween-80 in 550 mg mešanice lipidov. Skupno prostornino smo z destilirano vodo prilagodili na 120 ml. Zmes mešamo, filtriramo in shranimo na enak način kot prejšnji medij..

Hranilna sredstva so emulzija s specifično težo približno 1,075 g / cm3, ki se čez dan pri 5 ° C ne stratificira..

Izdelava lupine kapsule

Sestava lupine je pripravljena na naslednji način: v kovinski posodi na električnem štedilniku pri 110-115 ° C se stopi 59,4 parafina in 39,6 čebeljega voska, nato se doda 1 oleinska kislina. Staljena masa se filtrira skozi plast bombažne volne, pakira in shrani v kovinsko posodo, ki ščiti pred prahom. Kaljeni material lupine je rumena amorfna masa s tališčem 85-90 ° C.

Med množično proizvodnjo navadne čipke je priporočljivo, da se v specializiranem podjetju izdeluje hranilni medij ali sestavni deli in kapsule..

Tehnika redčenja čipk na mikrokapsuliranih hranilnih medijih

Gojenje čipk na mikrokapsuliranih hranilnih medijih kot tudi na kateri koli drugi obliki hrane vključuje naslednje glavne procese: vsebnost imaga, zbiranje jajčec čipke, inkubacija jajc, priprava in mikrokapsulacija umetnih hranilnih medijev, gojenje ličink, odraslih žuželk.

Vsebnost odraslih žuželk in zbiranje jajc. Imago je v valjastih kletkah s premerom 20 cm in višino 10 cm. Stene so izdelane iz tanke vinilne plastike debeline 3-4 mm ali drugega primernega materiala. Dno kletke je gaza, zložena v dveh slojih, pokrov pa temno gost papir. Dno in pokrov naboja sta pritrjena z gumijastim obročkom.

40. avtolizat pivski kvas in med s cvetnim prahom uporabljajo kot krmo za odrasle, kar pomaga povečati plodnost odraslih.

Avtolizata in medu nanesemo na posamezne kose penaste gume dimenzij 30x20x5 mm, ki jih nato suspendiramo v kletkah. Odrasli, dobljeni med razmnoževanjem laboratorijske populacije, naj bi prvih štiri do pet dni po rojstvu hranili le med, nato pa avtolizati med in kvas..

V eni kletki se hrani približno 100 parov žuželk. Plodnost ene samice s takšnim hranjenjem in gostoto je v povprečju 300 jajc na obdobje odlaganja jajc (20-25 dni). Hranjenje odraslih in odvzem jajc se izvajata po splošno sprejetih metodah vsaj enkrat dnevno. Kletke z odraslimi žuželkami vsebujejo pri 20-25 ° C in 70-80 relativne vlage v posebnem prostoru ali škatli.

Inkubacija jajc. Jajca iz čipk, ki jih dobimo v enem dnevu, raztresemo v petrijevih posodah in damo v termostat, v katerem se samodejno vzdržuje konstantna temperatura 25 ± 1,5 ° C in relativna vlažnost 75-80. V termostatu so dodatno nameščene fluorescenčne sijalke in naprave za spremljanje dnevne svetlobe. Takšen termostat se uporablja tudi za izobraževanje ličink in ohranjanje imaga..

Hkrati z inkubacijo jajc začnejo pripravljati hranilne medije in jih zapirati..

Priprava in mikrokapsulacija kulturnih medijev. Tehnologija priprave kulturnih medijev je podana zgoraj. Mikrokapsulacija se izvaja na posebni namestitvi, katere shema je predstavljena na slika 3.

Načelo delovanja naprave je naslednje: ohlajeni hranilni medij iz rezervoarja 1 pod pritiskom vstopi v notranji kanal enote za zapiranje 2. Istočasno iz rezervoarja 3 staljeni material iz lupine vstopi v režo med notranjimi in zunanjimi kanali enote 2. Potrebne temperaturne razmere se vzdržujejo v rezervoarjih 1 in 3, v sistemih za dovajanje lupine 4 in hranilnega medija 5 z ultratermostati 6 in 7. Potreben tlak medija in lupine se ustvari z uporabo reduktorja tlaka 8 in jeklenke s stisnjenim dušikom 9. V enoti za kapsulacijo 2 se doseže učinek tvorbe dveh tekočin curek pod vplivom površinske napetosti in temperaturnih padcev razpade na posamezne kapsule s hranilnim medijem. Kapsule strdijo ob padcu in se zbirajo v posodi 10.

Optimalen način delovanja vgradnje: tlak v sistemu znaša 4,5 kg / cm2, temperatura medija 8-12 ° C, temperatura lupine pa 85-90 ° C. Nastale mikrokapsule so kroglaste oblike, s premerom 400-600 mikronov, debelino lupine 15-20 mikronov. Vsebnost hranilnega medija v mikrokapsulah je vsaj 75-80 celotne mase. Dela na namestitvi z mikrokapsulacijo hranilnih medijev se izvajajo v skladu z navodili za njegovo uporabo.

Mikrokapsule so pritrjene na steklene plošče z lepilom, ki je peta vodna raztopina polivinil alkohola z dodatkom srebrovega nitrata kot antiseptik.

Lepilo pripravite na naslednji način: 50 g prahu polivinilnega alkohola raztopimo v stekleni bučki s 700 ml destilirane vode (temperatura vodne kopeli 70-80 ° C). Pripravljeno raztopino polivinilnega alkohola ohladimo na sobno temperaturo in vanjo damo 2 ml predhodno pripravljene 0,05 raztopine srebrovega nitrata. Nato se celotna prostornina prilagodi na 1000 ml. Lepilo lahko hranite v zaprti posodi pri temperaturi 3-7 ° C dva meseca. Steklene plošče z mikrokapsulami, lepljenimi v enem sloju in postavljene v eksikatorje, lahko hranite v hladilniku 10-12 dni pri temperaturi 3-7 ° C in relativni vlažnosti 70-90 (v eksikatorjih).

Seznam materialov, potrebnih za pripravo gojišč in nosilcev kapsul:

1. Peptone.
2. Kazein enzimatski hidrolizat.
3. Encimat hidrolizat sojinih beljakovin.
4. Izvleček pšeničnih kalčkov.
5. Ekstrakt kvasa.
6. Saharoza.
7. Hidrirano stisnjeno sojino olje.
8. Sončnični lecitin.
9. Holesterol.
10. Holin klorid.
11. Askorbinska kislina.
12. Cianokobalamin (B12).
13. Nikotinska kislina.
14. Kalcijev pantotenat.
15. Tiamin klorid.
16. Piridoksin klorid (B6).
17. Riboflavin (B2).
18. Folna kislina.
19. Biotin.
20. Inozitol.
21. Natrijev fosfat monosubstituiran.
22. Kalijev fosfat je substituiran.
23. Magnezijev sulfat.
24. Oksidirani železov sulfat.
25. Barva nevtralno rdeča.
26. Twin 80.
27. Parafinski vosek.
28. Čebelji vosek.
29. Oleinska kislina.
30. Polivinil alkohol.
31. Metilni ester P-hidroksibenzojske kisline.

Nega ličinke. Izločanje in razvoj ličink poteka v specializiranih kletkah, ki jih sestavljata dve plošči, velikosti 18-24 cm in v obliki papirnatega jezička vmes.

Papirnate jezičke predhodno razkužimo s potopitvijo v alkoholno raztopino metabena (metil paraoksibenzojska kislina) in sorbinske kisline (1 g metabena in 2 g sorbinske kisline raztopimo v 1 litru etilnega alkohola). Raztopino pripravimo vnaprej in shranimo v hladilniku v posodi z mletim zamaškom. Po obdelavi se jezički nekaj ur sušijo na zraku.

Po treh dneh hranjenja v termostatu se jajčne celice enakomerno raztresejo po celicah zavihkov s hitrostjo enega ali dveh jajc na celico. Vezalke postavimo nazaj v termostat, kjer vzdržujemo 16-urno dnevno svetlobo. Po začetku izvalitve ličink se zgornja plošča kletke nadomesti s ploščo z umetnim inkapsuliranim hranilnim medijem. Da bi ličinke vzgajali od trenutka ponovnega rojstva do prve molte, je dovolj, da krožnik s hrano zamenjate enkrat (dva do tri dni po ponovnem rojstvu). Pridelek ličink drugega proizvajalca, ki se uporabljajo za množično proizvodnjo v rastlinjaku, je 60–70.

Ugotovljeno je bilo, da je za pridobitev polnopravnih odraslih žuželk in povečanje njihovega pridelka treba ličinke prve dobe nahraniti z jajci žitnega molja, nato pa se ličinke drugega in tretjega stoletja gojijo na umetnem mikrokapsuliranem hranilnem mediju IV, ki najbolj zadovoljuje potrebe hranjenja ličink teh stoletij. Plošče z inkapsulirano hrano zamenjamo enako kot pri prvi starosti, enkrat na dva do tri dni. Poraba jajc zrnih moljev s tem vzorcem reprodukcije populacije je le 8–10 celotnih potreb po krmi. Za rejo 1000 ličink prve dobe je potrebno porabiti približno 35 g umetne krme (srednja I-III), za rejo ličink drugega in tretjega stoletja med reprodukcijo populacije - 60-70 g (srednja IV).

Pridobivanje odraslih žuželk. Papirnate zavihke s kokoni šest do sedem dni po zenitvi ličink prenesemo v kletke za odrasle. Oživljanje odraslih žuželk se zgodi osmi do deveti dan. Donos normalno oblikovanih odraslih doseže 70. Žuželke, ki letijo, se hranijo, kot je prikazano zgoraj. Polaganje jajc se običajno začne šest do osem dni po ponovnem rojstvu imaga..