Tehnologija gojenja pisusov
Med množično razmnoževanjem podij se gosenice zimske zajemalke, veliki voščeni molj ali mlinski molj najpogosteje uporabljajo kot žrtev za prehrano ličink in odraslih plenilcev. Tehnologijo množičnega razmnoževanja teh žuželk so obvladali številni biološki laboratoriji. Morfološke in biološke značilnosti zimskih zajemalk najdete v članku
Vsebina
Tehnologija množičnega laboratorijskega gojenja zimskih zajemalk
Obstoječe metode za množično laboratorijsko rejo zimskih zajemalk so rezultat dolgoletnih raziskav o izbiri najcenejših umetnih hranilnih medijev in metod za vzrejo zimskih zajemalk. Tehnologija množične reje te fitofage vključuje številne tehnološke procese:
- pridobivanje izhodnega materiala maternice-
- proizvodnja umetnih hranilnih medijev-
- gojenje gosenic-
- pridobivanje lutk in metuljev.
Izvorni material za laboratorijsko vzrejo zimskih zajemalk so starejše gosenice, zbrane v žariščih za distribucijo in jih hraniti v laboratoriju. Zbrane zimske zajemalke gosenic v velikosti 50–75 vzorcev se dajo v plastične ali kovinske kivete dimenzij 45 × 35 × 7 cm. Žaganje se predhodno navlaži in sterilizira v pečici 4 ure pri temperaturi 90 ° C in vlije v kivete, visoke 4–5 cm. Za vlaženje žagovine dodajte 100 ml destilirane vode na vsakih 300 g in dobro premešajte. Na površino žagovine, na katero je položena krma, so sveži listi tobaka, zelja ali kvinoja, je postavljena steklena plošča debeline 2-3 mm in velikosti 30 × 25 cm. Da se izognemo plazenjem gosenic, so kivete prekrite s steklom ali gosto krpo, ki je pritrjena z elastičnim trakom. Sprememba krme se opravi, ko se krma poje ali posuši (običajno vsak drugi dan). Hkrati se izločijo iztrebki. Tri do štiri dni po tem, ko so gosenice odrezane, se kivete odprejo in lutke naberejo s pomočjo presejanja žagovine skozi sito št. 2. Kapice ločimo po lastnostih in jih damo v eksikatorje. Za ustvarjanje optimalne vlažnosti je na dnu eksikatorja nameščena steklenica z vodo in bombažni stenik. Nato nastavite porcelanski krog in ga pokrijte z dvema slojema filtrirnega papirja. Na vrh papirja je nameščena enojna plast gaze, na katero so nameščene 25 (s premerom eksikatorja 19 cm) ali 50 (s premerom 25 cm). Eksikator je prekrit z gazo in pokrit s pokrovom. Eksikatorji so postavljeni na stojalo v prostoru, kjer se temperatura vzdržuje na 17-21 ° C.
Pupa se lahko hrani v kristalizacijskih skodelicah CTK-180 v termostatu. Na dnu skodelice sta nameščena dva kroga filtrirnega papirja in plast gaze, na kateri je v enem sloju postavljenih 25–30 pupov. Na vrhu skodelice je pokrit z gazo in steklom. Termostat vzdržuje relativno vlažnost 65-75.
Metulji, ki letijo v parih (dva ali trije pari), so posajeni v izolatorje, ki so cilindrični okvirji iz kovinske mreže ali žice višine 30 cm in premera 15-20 cm, prekriti z gazo. Od zgoraj je okvir prekrit z eno plastjo gaze in pritrjen z elastičnim trakom. Za dodatno prehrano v notranjost izolatorja postavimo Petrijevo posodo s koščkom pene, namočeno v 7 sladkornega sirupa. Metulji se hranijo vsak dan, jajčeca pa jemljejo vsak drugi dan. Optimalni pogoji za zadrževanje metuljev in odlaganje jajc pri samicah so: temperatura 18-23 ° C in relativna vlažnost 75-80. Sveže položena jajca se razrežejo s koščkom gaze in jih 10 minut sterilizirajo z 2 formalina, nato pa se sperejo s tekočo destilirano vodo (1,5-2,0 L). Sterilizirana jajca (za odstranjevanje odvečne vlage) postavimo na sterilni papir v sterilni petrijevi posodi po 50 kosov. v vsakem. Skodelice so postavljene v termostat s temperaturo 24-25 ° C in relativno vlažnostjo 80-90 do oživitve gosenic. Gosenice se prerodijo in so izvorni material za laboratorijsko vzrejo zimskih zajemalk na umetnih hranilnih medijih.
Za množično laboratorijsko rejo zimskih zajemalk so na voljo trije recepti za polsintetično hranilno gojišče (v gramih na 1 kg gojišča):
Sreda št. 1. Zelenjavna osnova - listi zelja:
- Listi svežega zelja - 350,0-
- Pšenični kalčki - 40,0-
- Agar Agar - 22.5-
- Askorbinska kislina - 6,0-
- Avtolizata pivovarskega kvasa - 60,0 ml-
- Metaben <2,0 (ali sorbinska kislina - 0,5)-
- 7,40 formalina - 1,3 ml-
- destilirana voda - do 1,0 kg.
Sreda št. 2. Zelenjavna osnova - koruzna moka:
- Koruzna kaša - 132,0-
- Pšenični kalčki - 32,0-
- Agar-agar -18,0-
- Suhi pivski kvas - 34,0 (ali hefefitin - 45,0)-
- Metaben - 2,0 (ali sorbinska kislina - 0,5)-
- Askorbinska kislina - 4.6-
- 7,40 formalin - 1,6 ml-
- destilirana voda - do 1,0 kg.
Sreda št. 3. Rastlinska osnova - semena fižola:
- Otekle semenke fižola - 200,0-
- Agar Agar - 15,0-
- Pšenični kalčki - 30,0-
- Gethefitin - 45,0-
- Askorbinska kislina - 5,0-
- Metaben - 2,0 (ali sorbinska kislina - 0,5)-
- 7.40 formalin 2.0-
- destilirana voda - do 1,0 kg.
Kuhalni medij št. 1 nastaja v naslednjem zaporedju: listje zelja se drobi skozi mlinček za meso, pšenični kalčki pa - v mlinu Pirouette stehtajo agar-agar s polovičnim odmerkom vode, raztopijo v vodni kopeli, presnovek pa v 10 ml etilnega alkohola. Avtolizat pivskega kvasa je pripravljen po metodi N.M. Edelman (1962), torej pivski kvas, predhodno hranimo 2 uri v hladilniku, nato ga v bučko ali kozarec damo v termostat ali pečico pri temperaturi 50 ° C dva dni. Vzorci vseh drugih sestavnih delov se dajo v ločeno posodo.
Po raztapljanju agar-agarja ga vlijemo v 1-2-litrski porcelanski kozarec, nato pa s temeljitim mešanjem dodamo sesekljane liste zelja, pšenični kalček, avtolizat pivskega kvasa, metaben, formalin, preostanek vode in nazadnje askorbinsko kislino, raztopljeno v 50 ml vode. Tako dobljeno homogeno maso prenesemo v posodo, predhodno sterilizirano v avtoklavu ali v pečici (4 ure pri 160-180 ° C), pokrijemo s sterilno kalorično krpo in en dan shranimo v baktericidni škatli. Takšno okolje je pripravljeno za uporabo. Če ga ne potrebujemo, ga damo v hladilnik, kjer ga lahko hranimo dva do tri tedne. Daljše ohranjanje okolja je nezaželeno.
Za pripravo medija št. 2 agar-agar raztopimo v vodni kopeli v polni količini vode. Vse ostale sestavine damo v porcelan in dobro premešamo. Raztopljeni agar-agar ohladimo na 55 ° C, nato pa ga prelijemo v porcelanski kozarec, v katerem so vse ostale komponente, in nastalo zmes temeljito premešamo. Naslednje operacije se izvajajo med pripravo medija št. 1.
En do dva dni prej kuhalni medij št. 3 fižol namočimo v enaki masni količini vode. Na dan priprave gojišča fižol prenesemo skozi mlinček za meso, nato pa ga zdrobimo s strojem za mletje tkanine PT-1 s polovično količino vode, dokler ne dobimo homogene mase. Del agar-agarja raztopimo v majhni količini vode, ki ostane. Vse suhe sestavine, razen askorbinske kisline, vlijemo v mleti fižol, vlijemo formalin, premešamo in raztopimo agar. Po temeljitem mešanju dodamo askorbinsko kislino in ponovno premešamo. Vsi drugi postopki se izvajajo, tako med pripravo medija št. 1.
Primerjalni testi različnih sestavkov so pokazali njihovo enako prehransko vrednost. Torej, med gojenjem gosenic zimskih moljev na gojiščih št. 1 in št. 2 je bilo trajanje njihovega razvoja 31,3 oziroma 30,5 dni, stopnja preživetja je bila 61,2 in 63,6, teža pupa 285 in 274 mg, samci pa 283 in 271 mg, povprečna plodnost samic - 651 in 639 kosov. jajca. Hitrost pretoka medija za pridobivanje 1000 kašic v obeh okoljih je 9-10 kg.
Izbira srednje sestave za množično laboratorijsko rejo zajemnic je odvisna od razpoložljivosti potrebnih komponent.
Za ohranjanje sterilnosti umetnega hranilnega medija je treba njegovo pripravo opraviti v izoliranem prostoru, posebej opremljenem z baktericidno svetilko. Vsi pripomočki in orodja, ki se uporabljajo pri pripravi gojišča, morajo biti predhodno sterilizirani.
Priporočljivo je gojenje zimskih gosenic z zajemalko v dveh odmerkih.
Prva metoda gojenja zimskih gosenic z zajemalkami
Prvi trik je od oživitve gosenic do šestega stoletja. V tem obdobju so gosenice, ki so oživele, postavljene v kristalizacijske skodelice CTK-180, 50 kosov. v vsakem. Na eni strani skodelice se na dno nanese kos srednje teže, ki tehta 10-15 g in debeline 0,5 cm, na nasprotni strani pa likamo koščke filtrirnega papirja (da absorbirajo odvečno vlago), kamor gredo poti čez dan.
Vsaka skodelica je prekrita z mehčano sterilno kalorično krpo, ki je pritrjena z elastičnim trakom in od zgoraj pokrita s steklom. Skodelice z gosenicami so nameščene v termostatu s konstantno temperaturo 24-27 ° C, relativno vlažnostjo 75-85 in nastavljivo dnevno svetlobo najmanj 16 ur.
Dodajanje krme gosenicam in odstranjevanje iztrebkov v prvi do tretji starosti se opravi vsaj enkrat na šest do sedem dni. Od četrtega dobe, ko gosenice začnejo jesti več hrane, dodajanje svežega medija in odstranjevanje iztrebkov poteka enkrat na dva do tri dni.
Druga metoda gojenja gosenic zimskih zajemalk
Drugi trik je od šeste starosti gosenic do stopnje zenice.
Po taljenju v šesti starosti se gosenice prenesejo v plastične ali kovinske kivete velikosti 45 × 35 × 7 cm. V vsaki kiveti (zdrgnjeni z 10 formalina in alkohola) navlaženo sterilno žagovina vlijemo s plastjo 3-4 cm, predhodno sterilizirano 4 ure postavimo na površino žagovine. pri 180 ° C in steklen krožnik podrgnite z alkoholom. Šest do osem kosov srednje velikosti 5-10 g se postavi na krožnik. V kiveti se postavi 50-75 gosenic. Zgoraj, da se izognemo plazenjem gosenic, je kiveta prekrita s steklom, zdrgnjena z alkoholom ali sterilno kalorično krpo in zategnjena z elastičnim trakom. Kivete so nameščene v termostatu ali na stojala v prostoru, kjer se vzdržujejo enaki pogoji kot med gojenjem gosenic prvega vnosa. Hrano spremenite in odstranite iztrebke, ko jedo okolje, vendar vsaj enkrat na dva do tri dni.
Tri do štiri dni po koncu hranjenja gosenic se žaganje s palet preseje, mladiče se nabere in, če se ločijo glede na njihove značilnosti, položi v eksikatorje, dokler odrasla oseba ne zapusti. Celoten cikel razvoja zimskih zajemalk od odraslih do odraslih med gojenjem gosenic na umetnih hranilnih medijih traja 50–55 dni. Nenehna reja zimskih zajemalk za osem generacij ne vpliva negativno na sposobnost preživetja prebivalstva. Skupni donos od trenutka oživitve gosenic do odraselka pri vseh generacijah znaša od 66,3 ± 1,7 do 61,2 ± 1,5. Povprečna masa lutk je 336,0 ± 5,1 mg - 275 ± 3,8 mg. Skupna pretočnost medija za pridobitev 1000 kosov. pupae je 8-10 kg.
Da bi preprečili onesnaževanje s hranilnim medijem in okužbo z bakterijskimi in drugimi boleznimi žuželk, je treba dosledno upoštevati aseptične pogoje. Da bi to naredili, je treba vsa dela, povezana s plemenskimi zajemalkami, izvajati v posebnih izoliranih prostorih (vsaj v štirih), vključno z: sobo za kuhanje hranilnih medijev z baktericidno svetilko, pralnico, za hranjenje mladičev in pridobivanje metuljev, jajc in insectarjev z baktericidna sijalka.
Dostop do sekalnice ni dovoljen. Redno, vsaj enkrat na teden, termostate, stojala, stene (morajo biti prekrite s ploščicami ali oljno barvo), tla pa je treba očistiti z 1 raztopino formalina. Vsa orodja in pripomočke je treba pred uporabo v avtoklavu ali pečici sterilizirati.
Reja Pisus
Tehnološki postopek množične vzreje podysusa vključuje dva bloka in več medsebojno povezanih podprocesov.
Prvi blok je množična vzreja žrtev podise (zimske zajemalke, voščeni moli ali mlinski moli)-
Drugi sklop je množična vzreja hrošča dviganja.
Podprocesi:
- Sezonsko množično razmnoževanje ličink hroščev za terenske izpuste-
- Celoletno vzdrževanje maternične kulture podususa-
- Sezonska množična plemenska plena (gosenice zimske zajemalke, voščeni molj ali mlinček)-
- Celoletno vzdrževanje maternične kulture žrtev podise (zimska zajemalka, mlinski pljunek).
Prvi tehnološki podproces vključuje naslednje operacije: inkubacija plenilskih jajc, zadrževanje ličink prvega ali tretjega stoletja, izpuščanje ličink drugega in tretjega stoletja na polju proti koloradskem krompirjevemu hrostu ali drugim rastlinskim škodljivcem.
Jajca Podysus so v petrijevih posodah ali organskih steklenih kasetah 200-400 kosov. pri temperaturi 24-28 ° C in relativni vlažnosti 60-70. Pred oživitvijo ličink se v termostatu ali termostatski sobi nastavi fotoperiod: 16 ur - dan in 8 ur - noč. Zimske gosenice takoj po taljenju do druge starosti v Petrijeve posode ali kasete postavijo kot hrano, ki se obnavljajo vsak drugi dan. Vsebujejo ličinke plenilcev pri temperaturi zraka 24-26 ° C, relativni vlažnosti 60-70 in 16-urni dnevni svetlobi.
Po taljenju do tretje starosti se lahko ličinke podisusa naselijo v agrocenozah različnih kultur, da se zaščitijo rastline pred koloradskim hroščem ali drugimi škodljivci.
Drugi tehnološki podproces vključuje naslednje operacije: inkubacija jajc, vzdrževanje ličink prve dobe, vzdrževanje ličink drugega in tretjega stoletja, vzdrževanje ličink četrtega in petega stoletja ter oskrba imaga z nadaljnjim odvzemom jajc.
Vsebnost ličink pred četrtim in petim stoletjem v tem podprocesu je podobna vsebini v prvem podprocesu.
Po taljenju v četrti starosti se ličinke postavijo v kletke za ohranjanje materničnega materiala. Kot vrtove lahko uporabite steklene kozarce, vrtove iz pleksi stekla, vrtove z plinskim mlinom. Kot prehranjevanje ličink uporabljajo gosenice velikega voščenega molja. Pogoji pridržanja: temperatura - 24-26 ° С, relativna vlaga - 60-70 in svetlobni dan 16 ur.
Po begu se imagoji postavijo na vrtove za vzdrževanje materničnega materiala z uporabo vrtov z mlinarskim plinom ali vrste vrtov Franz. Odrasle se gojijo pod enakimi pogoji kot ličinke, pri čemer se za gosenice uporabljajo velike voščene molje ali mlinske glive. Jajca, ki jih odložijo samice, se zbirajo in štejejo dnevno. Štetje jajc se izvaja z metodo teže - 1 g vsebuje 2 tisoč jajc plenilca.
Povprečni kazalniki razvoja podusa v optimalnih laboratorijskih pogojih so naslednji:
- razvojno obdobje od jajčeca do imaga - 26-29 dni-
- plodnost jajčec od 8. do 42. dneva življenja samic - 75–85-
- dejanska plodnost samic v šestih tednih življenja - 210-220 jajčec-
- razmerje spolov je 1: 1-
- začetek obdobja odlaganja jajc po rojstvu je šest do osem dni.
Podpora kulturam žrtev, pa tudi njihova množična reprodukcija poleti, poteka na umetnih hranilnih medijih. Trenutno so za vrste, kot so veliki voščeni molj, mlinski bog in zimska zajemalka, razvili veliko poceni plemenskih medijev, ki omogočajo, da v določenem obdobju dobite potrebno število žrtev.
Inženirski in tehnološki inštitut "Biotehnologija" NAAS Ukrajine (Odesa) je razvil in izdelal komplet opreme za množično industrijsko vzrejo podysus.
Komplet vključuje:
- Klimatska komora 2 kos-
- Vložek za ličinke hroščev 2250 kosov-
- Kletka za vzdrževanje maternične kulture 20 kosov-
- Kletka za vsebino za odrasle 20 kosov-
- Vrtna polica 2 kos.
Klimatska komora je zasnovana tako, da zagotavlja optimalne temperature, vlažnost in fotoperiodo med gojenjem ličink podiusov.
Kaseta za ličinke je zasnovana za inkubacijo jajc in vsebnost ličink plenilca prvega ali tretjega stoletja. Prostornina kasete - 0,6 dm3, skupne dimenzije - 160 × 160 × 25 mm.
Kletka za maternično kulturo podiza je namenjena zadrževanju odraslih in zbiranju jajčec plenilca. Volumen vrta - 7 dm3, skupne dimenzije -300 × 260 × 120 mm.
Kletka za zadrževanje odraslih je namenjena zadrževanju odraslih in nabiranju jajc plenilca med njegovo množično vzrejo. Volumen vrta - 100 dm3, splošne dimenzije - 600x600x600 mm.
Stojala so zasnovana za namestitev vrtov z imago dvigom. Skupne dimenzije - 3000 × 600 × 1800 mm.
Izvedba ličink pleničev na en cikel delovanja opreme - 0,5 kos..
Diagram biolaboratorija za industrijsko vzrejo podususa:
- Prostor za pripravo umetne kulture (IPA)-
- Prostori maternične kulture gnojnice-
- Prostori maternične kulture zimske zajemalke in druge žrtve gnojnice-
- Masivna soba Podizus-
- Množični rejski prostori za žrtve-
- Set klimatskih komor-
- Hladilnik-
- Sesekljalnik-
- Kotel z IPS razpršilnikom